上海起發現貨PROGEN PRHYPE說明書
在包裝常見的噬菌體展示噬菌粒時提供輔助噬菌體功能。通過pIII感染細菌。
貨號: PRHYPE
數量: 5 x 2 mL(lyoph。)
€504.00
純度 | PEG沉淀 |
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包裝單位 | 5x2 mL(lyoph。) |
背景:
從富含超噬菌體的文庫中分離重組抗體,蛋白質或多肽的有效工具。
輔助噬菌體技術(“Hyperphage系統”)由Rondot等人開發。(Nature Biotechnology 19:75-81,2001)。Hyperphage系統允許通過增加每個噬菌體顆粒顯示的抗體數量(高達5對0.01)來改善噬菌體展示中的抗體呈遞,從而該系統在功能基因分析和蛋白質組學領域提供了巨大的優勢??梢杂蒙倭靠乖透蔬M行噬菌體的淘選。例如,通過在二維凝膠電泳后在蛋白質斑點的印跡上平移超噬菌體包裝的文庫,可以改善通用文庫用于抗體分離的應用。
可以通過淘選合成的膜結合肽表位來分析大量的開放閱讀框(ORF)。在癌癥研究中,超噬菌體包裝的文庫可以成為通過淘選細胞表面來發現新腫瘤標志物的工具。
Hyperphages在pIII基因中攜帶缺失。它們由產生功能性pIII的大腸桿菌包裝細胞系產生,所述功能性pIII用于包裝具有pIII缺失的噬菌體基因組。產生的超噬菌體在其表面攜帶功能性pIII,但在其基因組中缺乏pIII基因。然后可以使用這些超噬菌體用噬菌粒文庫感染細菌。每個得到的展示噬菌體在其表面上攜帶幾個拷貝的抗體或肽,因此顯著提高了淘選效率。
通過使用hyperphage,抗原結合增強了兩個數量級。此外,由于攜帶抗體的質粒(噬菌粒)編碼pIII和scFv片段之間的蛋白酶切割位點,可以通過蛋白酶處理洗脫超噬菌體包裝的文庫,允許洗脫高親和力的結合物,再加上恢復野生型感染性表型以優化感興趣的抗體基因的恢復。
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