上海起發現貨omegabiotek D6943說明書
使用旋轉微型柱從1-5 mL細菌培養物中分離質粒DNA
SKU: D6943
Category: Bacterial Plasmid
EZNA®Plasmid Mini Kit I旨在在30分鐘或更短的時間內從1-5 mL細菌培養物中分離出多達30 µg的高質量質粒DNA。利用HiBind®Mini Column技術將質粒DNA純化簡化為三個快速步驟:結合,洗滌和洗脫。純化的質粒DNA立即可用于多種下游應用,例如常規篩選,限制性內切酶消化和手動/自動熒光DNA測序。
EZNA®Plasmid Mini Kit備有2種不同類型的色譜柱:V型旋轉色譜柱有一個帶蓋(D6943),而Q型旋轉色譜柱沒有蓋(D6942)。在其他方面,這些列在使用和應用上是相同的。兩種色譜柱均可用于真空或離心方案。
僅供研究使用。不用于診斷過程。
特征 | 技術指標 |
---|---|
下游應用 | 克隆; 危險的排序,轉換等 |
起始原料 | 1-5 mL LB培養 |
質粒類型 | 高拷貝,低拷貝粘粒DNA |
處理方式 | 手動,離心或真空 |
通量 | 1-24 |
DNA結合技術 | 硅膠微型旋轉柱 |
裂解液清除方法 | 離心分離 |
處理時間 | <30分鐘 |
產量 | 15-25 µg(高拷貝數);0.1-5 µg(低拷貝數) |
特別說明 | 終止酵母質粒試劑盒的替代品 |
項目 |
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HiBind®DNA微型柱 |
2 mL收集管 |
解決方案一 |
解決方案二 |
解決方案三 |
HBC緩沖液 |
DNA洗滌緩沖液 |
核糖核酸酶A |
洗脫緩沖液 |
DNA濃度比較
圖1. 根據制造商推薦的方案進行了用pGEM載體轉化的4 mLDH5α培養物。通過用NanoDrop®2000c進行光密度測量來確定質粒DNA濃度。總洗脫體積為50 µL。
超卷DNA
圖2. 根據標準方案分離了用pGEM載體轉化的1 mLDH5α培養物。在1%瓊脂糖凝膠上分析5 µL洗脫質粒DNA。
通過Nanodrop進行DNA定量
表1. 用pGEM載體轉化的1 mLDH5α培養物。通過用NanoDrop®2000c進行光密度測量來確定質粒DNA濃度。總洗脫體積為50 µL。
桑格測序
表2. 用EZNA Plasmid Mini Kit I純化的質粒DNA用于5 µL Sanger測序反應。在Applied Biosystems 3730XL上分析DNA。
內毒素水平
表3. 質粒DNA制備物中的內毒素。按照每個制造商推薦的方案,從0.8 mL LB培養物中分離質粒DNA。內毒素水平用Thermo Scientific的Pierce LAL生色內毒素定量試劑盒測定。
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