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李記生物是一家本土高科技生物公司,專注于生命科學和生物技術領域,產品涵蓋細胞生物學、分子生物學、動物學等領域。李記生物產品品質與產品基本同步,部分產品優于進口產,該公司CCK-8試劑,支原體檢測試劑、蛋白Marker,核酸染料,胎牛血清等產品品質優異,具有易用、經濟、超性價比的特點。
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公司:http://www.life-ilab。。com/
訂購信息:
產品名稱 | 貨號 | 規格 | 保存 | 價格(元) |
活性檢測CCK-8細胞增殖與活性檢測試劑盒 | D3100L4053 | 1ml | 4℃ | 245 |
活性檢測CCK-8細胞增殖與活性檢測試劑盒 | D3100L4054 | 5ml | 4℃ | 595 |
活性檢測CCK-8細胞增殖與活性檢測試劑盒 | D3100L4055 | 10ml | 4℃ | 1050 |
活性檢測CCK-8細胞增殖與活性檢測試劑盒 | D3100L4056 | 30ml | 4℃ | 2080 |
活性檢測CCK-8細胞增殖與活性檢測試劑盒 | D3100L4057 | 100ml | 4℃ | 5850 |
產品描述
Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 細胞增殖與活性檢測試劑盒是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。其主要成分為水溶性四唑鹽WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜(formazan,參考圖1)。WST-8 被細胞內脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠直接溶解在培養基中。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。
圖1:WST-8分子結構及檢測原理
運輸與保存方法
冰袋運輸。CCK-8在4℃可保存一年,在-20℃可以存放數年,反復凍融會造成測定背景O.D值升高,如經常使用,建議存放于4℃即可。
操作方法
1. 在96孔板中配制100 μl的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養24小時 (在37℃,5% CO2的條件下)。
2. 向培養板加入10 μl不同濃度的待測物質。如果測定細胞活性,則不需要2-3步驟,直接從第四步操作。
3. 將培養板在培養箱孵育一段適當的時間 (例如: 6, 12, 24或48小時)。
4. 向每孔加入10 μl CCK-8溶液 (注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響O.D值的讀數)。
5. 將培養板在培養箱內孵育1-4小時。
6. 用酶標儀測定在450 nm處的吸光度。
注意事項
1)CCK-8試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化反應,如果待檢測體系中有較多還原劑(或抗氧化劑)會造成背景O.D值升高,干擾檢測結果。如果實驗中有還原劑,請檢查背景的O.D值,即測定、比較空白培養基加入藥物與不加藥物的培養基(含細胞)在加入CCK- 8試劑后的O.D值,如果空白O.D值明顯偏高,則說明有反應,應設法去除或折算干擾因素。
2)如果細胞培養時間較長,培養基顏色發生變化,應洗滌細胞更換培養基后再加CCK-8檢測。細胞培養基酚紅不影響測定結果。
3)為使CCK-8試劑盒培養基充分混勻,減少CCK-8在移液器上的殘留,建議加樣前用培養基稀釋CCK-8試劑,混勻后加樣。
4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
CCK-8與同類試劑比較
檢測方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK法 |
產品性狀 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
使用方法 | 配成溶液后使用 | 現配現用 | 即開即用 | 即開即用 |
檢測靈敏度 | 高 | 很高 | 很高 | 高 |
檢測時間 | 較長 | 較短 | 較短 | zui短 |
檢測波長 | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm |
細胞毒性 | 高,細胞形態*消失 | 很低,細胞形態不變 | 很低,細胞形態不變 | 很低,細胞形態不變 |
試劑穩定性 | 一般 | 較差 | 一般 | 很好 |
批量樣品檢測 | 可以 | 非常適合 | 非常適合 | 非常適合 |
便捷程度 | 一般 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
對應鏈接:http://www.life-ilab。。com/a/chanpinzhongxin/xibaoshengwuxue/xibaopeiyang/2016/0119/31.html
關鍵詞:CCK-8,CCK , cell counting kit, 細胞活性檢測,
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